新冠疫苗保護性能評估
為了應對新冠疫情威脅,目前已經(jīng)有很多國家開始了疫苗接種工作,但接種新冠疫苗后,產(chǎn)生的保護效果并不確定,評估新冠疫苗有效性的重要指標之一就是接種者體內(nèi)中和抗體的含量。針對大規(guī)模疫苗接種后的人群,使用簡單、快速的膠體金免疫層析法,可快速評估每個接種者體內(nèi)的抗RBD抗體及中和抗體的水平。
采用膠體金免疫層析技術(shù),通過雙抗原夾心法測試RBD結(jié)合抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū),血清會在毛細作用下向前層析,結(jié)合墊上的膠體金會溶解,然后和血清一起向前移動。血清到達檢測區(qū)后,膠體金標記的S-RBD、血清中的抗體與檢測線上包被的S-RBD形成復合物,表現(xiàn)為檢測線顯色,血清中的抗體含量與檢測線顯色強度成正相關(guān)。反應結(jié)束后,直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測儀進行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強弱,可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。
膠體金免疫層析檢測RBD結(jié)合抗體
應用場景
血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學診斷及疫苗臨床效果評價—抗RBD總抗體檢測。
測試結(jié)果
標記: 膠體金標記S-RBD (bs-46003P)和膠體金標記兔IgG (bs-0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (bs-0295G),T線為S-RBD (bs-46003P/bs-46005P)
備注:“+++”表示反應很強;“++”表示反應較強;“+”表示反應較弱;“±”反應很弱;“-”表示無反應。
采用膠體金免疫層析法的競爭法測試RBD中和抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū),血清會在毛細作用下向前層析,結(jié)合墊上的膠體金會溶解,然后和血清一起向前移動。血清到達檢測區(qū)后,膠體金標記的S-RBD與檢測線上包被的ACE2結(jié)合,并被固定在檢測線上,表現(xiàn)為檢測線顯色,而血清中的中和抗體會與檢測線上的ACE2競爭結(jié)合S-RBD,從而導致固定在檢測線上的S-RBD減少,檢測線顯色下降。反應結(jié)束后,直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測儀進行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強弱,可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。
膠體金免疫層析檢測RBD中和抗體
應用場景
疫苗臨床效果評價、康復者血清中保護性抗體水平檢測—模擬病毒侵襲細胞過程,通過阻斷RBD與ACE2的結(jié)合間接評價機體內(nèi)抗RBD中和性抗體的水平。
測試結(jié)果
標記: 膠體金標記RBD (bs-46003P)和膠體金標記兔IgG (bs-0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (bs-0295G),T線為Human ACE2 (bs-46001P/bs-46002P)
由此可見,陰性血清無中和活性,而陽性血清中含有中和性抗體,血清稀釋倍數(shù)在1:200時可完全阻斷RBD與ACE2的結(jié)合。
Bioss提供新冠抗體及中和性抗體檢測原料
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Recombinant Human ACE2 (His-Avi tag, HEK293) |
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Recombinant Human ACE2 (Fc-Avi tag,HEK293) |
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Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD (His-Avi,HEK293) |
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Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD (Fc-Avi,HEK293) |
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